IPTG CAS:367-93-1 Cijena proizvođača
Izopropil β-D-1-tiogalaktopiranozid (IPTG) je sintetski analog laktoze koji se obično koristi u istraživanju molekularne biologije i biotehnološkim primjenama.IPTG se prvenstveno koristi za induciranje ekspresije gena u bakterijskim sustavima, gdje služi kao molekularni okidač za pokretanje transkripcije ciljnih gena.
Kada se doda u medij za rast, bakterije preuzimaju IPTG i mogu se vezati za lac represorski protein, sprječavajući ga da blokira aktivnost lac operona.Lac operon je skupina gena uključenih u metabolizam laktoze, a kada se ukloni represorski protein, dolazi do ekspresije gena.
IPTG se često koristi u kombinaciji s lacUV5 mutantnim promotorom, koji je konstitutivno aktivna verzija lac promotora.Kombinacijom indukcije IPTG s ovim mutantnim promotorom, istraživači mogu postići visoke razine ekspresije gena.To omogućuje proizvodnju velikih količina proteina za pročišćavanje ili druge daljnje primjene.
Uz ekspresiju gena, IPTG se također često koristi u testovima plavo/bijelog probira.U ovoj tehnici, gen lacZ obično se spaja s genom od interesa, a bakterije koje uspješno eksprimiraju ovaj fuzijski gen proizvest će aktivni enzim β-galaktozidazu.Kada se IPTG doda zajedno s kromogenim supstratom kao što je X-gal, bakterije koje izražavaju fuzijski gen postaju plave zbog aktivnosti β-galaktozidaze.To omogućuje identifikaciju i odabir rekombinantnih sojeva koji su uspješno integrirali gen od interesa.
Indukcija ekspresije gena: IPTG se obično koristi za indukciju ekspresije ciljnih gena u bakterijskim sustavima.Oponaša prirodni induktor laktozu i veže se na lac represorski protein, sprječavajući ga da blokira lac operon.To omogućuje transkripciju i ekspresiju željenih gena.
Ekspresija i pročišćavanje proteina: IPTG indukcija se često koristi za proizvodnju velikih količina rekombinantnih proteina za različite svrhe, kao što su biokemijske studije, terapijska proizvodnja ili strukturna analiza.Korištenjem odgovarajućih vektora ekspresije i indukcije IPTG, istraživači mogu postići visoke razine ciljne proizvodnje proteina u bakterijskim domaćinima.
Plavo/bijeli probir: IPTG se često koristi u kombinaciji s lacZ genom i kromogenim supstratom, kao što je X-gal, za plavo/bijele probirne testove.Gen lacZ obično je fuzioniran s genom od interesa, a bakterije koje uspješno eksprimiraju ovaj fuzijski gen proizvest će aktivni enzim β-galaktozidazu.Kada se dodaju IPTG i kromogeni supstrat, rekombinantni sojevi koji izražavaju fuzijski gen postaju plavi, što omogućuje jednostavnu identifikaciju i odabir.
Proučavanje regulacije gena: Indukcija IPTG-a obično se koristi u istraživanjima za proučavanje regulacije gena i operona, osobito lac operona.Manipuliranjem koncentracija IPTG-a i praćenjem ekspresije komponenti lac operona, istraživači mogu istražiti mehanizme regulacije gena i ulogu različitih čimbenika ili mutacija.
Sustavi genske ekspresije: IPTG je ključna komponenta u nekoliko sustava genske ekspresije, kao što su sustavi temeljeni na promotoru T7.U tim sustavima, lac promotor se često koristi za pokretanje ekspresije T7 RNA polimeraze, koja zauzvrat transkribira ciljne gene pod kontrolom sekvenci T7 promotora.IPTG se koristi za induciranje ekspresije T7 RNA polimeraze, što dovodi do aktivacije ekspresije ciljnog gena.
| Sastav | C9H18O5S |
| Ispitivanje | 99% |
| Izgled | bijeli prah |
| CAS br. | 367-93-1 |
| Pakiranje | Mali i rasuti |
| Rok trajanja | 2 godine |
| Skladištenje | Čuvati na hladnom i suhom mjestu |
| Certifikacija | ISO. |
