Fenilgalaktozid CAS: 2818-58-8

Učinak na aktivnost enzima: Fenilgalaktozid se obično koristi za mjerenje aktivnosti enzima β-galaktozidaze.Kada se fenilgalaktozid hidrolizira β-galaktozidazom, oslobađa p-nitrofenol.Akumulacija p-nitrofenola može se kvantitativno mjeriti, pružajući uvid u aktivnost β-galaktozidaze.Taj se učinak koristi u primjenama kao što su enzimske analize i sustavi probira.

Analiza ekspresije gena: Fenilgalaktozid se često koristi kao supstrat u eksperimentima molekularne biologije za proučavanje ekspresije gena.Gen lacZ, koji kodira β-galaktozidazu, obično je spojen s regulatornim sekvencama drugih gena od interesa.Ekspresija gena lacZ i hidroliza fenilgalaktozida pomoću β-galaktozidaze mogu ukazivati ​​na obrazac ekspresije i razinu ciljnog gena koji se proučava.

Sustavi probira: Fenilgalaktozid je važna komponenta sustava probira koji koriste aktivnost β-galaktozidaze.Jedan široko poznat primjer je plavo-bijela metoda probira, koja se koristi za identifikaciju rekombinantnih ili transformiranih stanica u eksperimentima molekularne biologije.Kolonije koje su uspješno preuzele rekombinantnu DNA ili su podvrgnute genetskoj rekombinaciji će eksprimirati β-galaktozidazu, što dovodi do hidrolize fenilgalaktozida i stvaranja plave boje.

Pročišćavanje proteina: U nekim slučajevima, fenilgalaktozid se može koristiti kao ligand za afinitetnu kromatografiju za pročišćavanje proteina koji se specifično vežu na β-galaktozidazu ili su aktivirani njome.Protein od interesa može imati oznaku afiniteta ili fuzijsku oznaku koja sadrži domenu vezanja β-galaktozidaze.Propuštanjem proteinske smjese kroz kolonu s imobiliziranim fenilgalaktozidom, željeni protein se može selektivno zadržati i zatim eluirati.